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ProteoLiposome BD Expression Kit (CFS-PLE-BD)

厂家:天根生化科技(北京)有限公司
  目录号 规 格 价 格
CFS-PLE-BD 2.5 ml×6 rxn 50000元
产品简介

本系列试剂盒特别针对膜蛋白表达设计,能够通过质粒模板实现膜蛋白的大量表达。本系列试剂盒采用转录和翻译非?#21058;?#30340;方法,试剂盒中提供SP6 RNA聚合酶,NTPRNase Inhibitor以及Transcription Buffer LM,加入模板后先完成DNA的转录,再配?#19979;?#32986;无细胞蛋白表达系统预混mix完成mRNA的翻译,该mix中包含蛋白翻译的所有必需酶类、各种tRNA和离子,加入脂质体之后,目的蛋白能够在脂质体的生物膜上正确合成和组装。本系列试剂盒利用双层液相反应法(Bilayer)表达目的蛋白,每个反应蛋白表达量为500 μg左右,适合western blotCBB染色等蛋?#20934;?#27979;实验和下?#25991;?#34507;白功能解析。


产品特点

针对性强:含有脂质体,特别针对传统方法难表达、难组装的膜蛋白设计

操作简单:采用Bilayer 反应方法,不需要特殊仪器,只需加入模板?#32431;?#36827;行反应

表达高效:一天内完成蛋白表达,蛋白表达量可达500 μg以上


储存条件

低于-70保存,避免长期存放于干冰环境,反复冻融不超过2次。


实验例


建议使用质粒模板进行蛋白表达。可以使用pEU系列质粒作为表达载体,将带有起始密码子和终止密码子的cDNA克隆至载体上,提取质粒后直接用于蛋白表达。亦可使用其他带有SP6启动子的表达载体进行蛋白表达,不要使用T7启动子。




蛋白翻译采用双层液相反应法(Bilayer Reaction Method),通过反应液和麦胚裂解物造成的密度差,相互渗透,在?#22909;?#30456;交处发生反应。随着时间的?#24179;?#28342;液逐渐由两相变为单一的混合物而终止。在下层液中加入脂质体(liposomes),蛋白可直接在脂质体上合成和组装。



使用ProteoLiposome BD Expression Kit表达25个膜蛋白,使用考马斯亮蓝(CBB)染色检测(PAGE图)蛋白表达效果。结果显示,25个膜蛋白都能成功表达,而且表达量均在mg级别,最大可达8.5 mg

地址:北京市海淀区西小口路66号东升科技园(北领地)C7-3 电话:800-990-6057
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